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(2010-11-19)
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梭菌的生化性状测定,须用特殊生化培养基。几种主要病原梭菌的基本生化特性如表22-5。
产气荚膜梭菌(Cl.perfringens)
本菌旧名魏氏梭菌或产气荚膜杆菌。在自然界分布极广,可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中,在一定条件下,也可引起多种严重疾病。
形态及染色特征 菌体直杆状,两端钝圆,0.6~2.4um×l.3~19.0um,单在或成双,短链很少出现,革兰氏染色阳性。无鞭毛,不运动。芽孢大而卵圆,位于菌体中央或近端,使菌体膨胀,但在一般条件下罕见形成芽抱。多数菌株可形成荚膜,荚膜多糖的组成可因菌株不同而有变化。DNA的G+Cmol%为24~27。
培养特性 本菌对厌氧程度的要求并不严,甚至在Eh=200~250mv的环境内也能生长。对营养要求不苛刻,在普通培养基上可生长,若加葡萄糖、血液,则生长更好。A、D和E型菌株的最适生长温度为45℃,B和C型为37~45C,多数菌株的可生长温度范围为20~50℃,偶有菌株于6℃有一定的繁殖力。此菌生长非常迅速,在适宜的条件下增代时司仅为8min。据此特性,可用高温快速培养法进行选择分离,即在45℃下每培养3~4h传代一次,可较易获得纯培养。
在绵羊血琼脂平板上,可形成直径2~5mm、圆形、边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、圆屋顶状的菌落,偶尔出现裂叶状边缘的粗糙菌落及丝状边缘的不规则扁平菌落等。菌落周围有溶血环,在兔、绵羊、牛、马或人血琼脂平板上,大多数菌株可产生双环溶血,内环为由毒素所弓起的完全溶血,外围由α毒素产生的不完全溶血环,些B型和C型菌株在绵羊或牛血琼脂平板上可由8毒素产生的较宽溶血环。
在乳糖牛奶卵黄琼脂平板上,菌落周围出现乳白色浑浊圈,是因所产生的a毒素分解卵黄中的卵磷脂所致,此反应可被α抗毒素抑制。由于发酵乳糖,菌落周围的培养基颜色发生变化 (中性红指示剂呈粉红色)。不消化牛奶,不分解游离脂肪,菌落周围不出现透明环及虹彩层。
在PYG(含蛋白栋Peptone,酵母浸膏Yemt extract及葡萄糖Glucose各1%的肉汤)肉汤中培养呈均匀浑浊,或有黏稠沉淀物,在PYG琼脂深层中培养可产生大量气体,在厌氧肉肝汤中,培养5~6h即呈均匀浑浊,并产生大量气体。
γθ生化特性 本菌最为突出的生化特性,是对牛乳培养基的"暴烈发酵"。于接种培养8~10h后,发酵牛乳中的乳糖,使牛乳酸凝,同时产生大量气体便凝块破裂成多孔海绵状,严重时被冲成数段,甚至喷出管外,也有例外的菌株。