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酿酒酵母细菌浓度测定步骤

2010-12-29 
测OD值 将1至7号不同浓度的菌悬液摇均匀后于560nm波长、1cm比色皿中测定OD值。比色测定时,用无菌生理盐水作空白对照,每管菌悬液在测定OD值时均必须......

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  1.菌种 酿酒酵母培养液

  2.仪器或其他用具 721型分光光度计,血细胞计数板,显微镜,试管,吸水纸,无菌吸管,无菌生理盐水等。

  (四)操作步骤

  1.标准曲线制作

  (1)编号 取无菌试管7支,分别用记号笔将试管编号为1、2、3、4、5、6、7。

  (2)调整菌液浓度 用血细胞计数板计数培养24小时的酿酒酵母菌悬液,并用无菌生理盐水分别稀释调整为每毫升1×106、2×106、4×106、6×106、8×106、10×106、12×106含菌数的细胞悬液。再分别装入已编好号的1至7号无菌试管中。

  (3)测OD值 将1至7号不同浓度的菌悬液摇均匀后于560nm波长、1cm比色皿中测定OD值。比色测定时,用无菌生理盐水作空白对照,每管菌悬液在测定OD值时均必须先摇匀后再倒入比色皿中测定

  (4)以光密度(OD)值为纵坐标,以每毫升细胞数为横坐标,绘制标准曲线。

  2.样品测定

  将待测样品用无菌生理盐水适当稀释,摇均匀后,用560nm波长、lcm比色皿测定光密度。测定时用无菌生理盐水作空白对照。

  各种操作条件必须与制作标准曲线时的相同,否则,测得值所换算的含菌数就不准确。

  3.根据所测得的光密度值,从标准曲线查得每毫升的含菌数。

  每毫升样品原液菌数=从标准曲线查得每毫升的菌数×稀释倍数

  polly110是这样做的,摇菌8-12h,然后对菌液十倍稀释进行平板计数法,得出每毫升的含菌量,再对菌液进行稀释,得到你所要求的10的9次方/CFU的悬液。

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