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检验微生物质粒存在时的措施方法

2010-12-18 
 不同产品中吸附柱吸附能力不同,如果需要提取的质粒量很大,请分多次提取。若用富集培养基,例如TB或2×YT,菌液体积必须减少若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很......

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  12. 碱裂解不充分:

  使用过多菌体培养液,会导致菌体裂解不充分,可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液P1、P2和P3的用量。对低拷贝数质粒,提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液P1、P2和P3,可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。

  13. 溶液使用不当:

  溶液P2、P3在温度较低时可能出现浑浊,应置于37℃保温片刻直至溶解为清亮的溶液,才能使用。

  14. 吸附柱过载:

  不同产品中吸附柱吸附能力不同,如果需要提取的质粒量很大,请分多次提取。若用富集培养基,例如TB或2×YT,菌液体积必须减少;若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率,则需减少LB培养液体积。

  15. 质粒未全部溶解(尤其质粒较大时) :

  洗脱溶解质粒时,可适当加温或延长溶解时间。

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