(2010-10-19)
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机械法转染技术也包括使用机械的方法,比如显微注射和基因枪(biolisticparticle)。显微注射使用一根细针头将DNA,RNA或蛋白直接转入细胞质或细胞核。基因枪使用高压microprojectile将大分子导入细胞。
阳离子脂质体试剂将阳离子脂质体试剂加入水中时,其可以形成微小的(平均大小约100-400nm)单层脂质体。这些脂质体带正电,可以靠静电作用结合到DNA的磷酸骨架上以及带负电的细胞膜表面。使用阳离子脂质体试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物。有研究报道,一个约5kb的质粒会结合2-4个脂质体。被俘获的DNA就会被导入培养的细胞。目前对DNA转导原理的证据主要来源于内吞体和溶酶体的研究。阳离子脂质体介导的转染法,由于转染效率高,细胞毒性很低,操作简便等特点,逐渐成为主要的转染试剂。随着基因表达和调控研究的深入,转染技术成为研究中一种重要的实验方法,从而推动了新一代转染试剂的研发和利用。天为时代公司开发的TRANSfection和TRANSquick基因转染试剂是最新一代的阳离子聚合物转染试剂的代表,对多种细胞的转染具有最高的转染效率。