(2010-10-19)
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1在整个转染过程中都应无菌操作。
2为获得最佳实验结果,DNA应不含蛋白质和酚。乙醇沉淀后的DNA应保持无菌,并在无菌水或TrisEDTA中溶解。
3沉淀物的大小和质量对于磷酸钙转染的成功至关重要。在磷酸盐溶液中加入DNA-CaCl2溶液时需用空气吹打,以确保形成尽可能细小的沉淀物,因为成团的DNA不能有效地粘附和进入细胞。
4在实验中使用的每种试剂都必须小心校准,保证质量,因为甚至偏离最优条件十分之一个pH都可能导致磷酸钙转染的失败。1了解细胞转染技术原理和基本方法