(2010-10-19)
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复性:变性DNA只要消除变性条件,二条互补链还可以重新结合,恢复原来的双螺旋结构,这一过程称为复性(renaturation)。
退火:通常DNA热变性后,将温度缓慢冷却,并维持在比Tm低25~30℃左右时,变性后的单链DNA即可恢复双螺旋结构,因此,这一过程又叫做退火。
复性后的DNA,理化性质都能得到恢复。倘若DNA热变后快速冷却,则不能复性。
影响复性速度的因素:
1、DNA浓度:愈高,复性速度也愈快。
2、DNA片段的大小:DNA片段愈大,扩散速度愈低,使DNA片段线状单链互相发现互补的机会减少。因此,在复性实验中,有时将DNA切成小片段,再进行复性。
3、温度:过高不利于复性。
4、溶液的离子强度:通常盐浓度较高时,复性速度较快。
5、DNA顺序的复杂性;简单的分子复性很快,如polyd和polyd由于彼此互补识别很快,故能迅速复性。但顺序较复杂的DNA分子复性则较慢。因此通过变性速率的研究,可以了解DNA顺序的复杂性。1了解细胞转染技术原理和基本方法