(2010-10-19)
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吖啶的基本结构为二苯并吡啶，在水溶液中呈弱碱性。1940年，发现当吖啶橙与酸性物质连接或存在于酸性物质中时，其特征光谱会发生一定的变化，至此一直被用于生物体的染色。吖啶橙可与DNA或RNA作用，与双链DNA(dsDNA)结合后的荧光激发/发射波长分别为502/538nm(水)。为提高染料稳定性及荧光强度，大量的吖啶衍生物被合成。Pavel等合成了系列硫代吖啶，并用毛细管液相色谱对其定量纯化分析。Naofumi合成了10-羧甲基吖啶酯，其荧光及稳定性都有很大提高，同时含有的羧基活性基可与生物分子共价结合。Cao等在吖啶橙给体与番红T受体之间建立了荧光共振能量转移(FRET)定量测定DNA的方法，其中给体的最大发射波长要与受体的吸收波长重叠，对小牛胸腺DNA的检测限为2.6×10-7mol·L-1。该法虽然灵敏度较高，但易受到牛血清白蛋白和人血清白蛋白的干扰。一些吖啶的络合物，会对小沟及DNA序列特异识别，有望成为DNA的转录抑制剂，控制核酸的表达。对位氨基取代的喹吖啶化合物对三链DNA有高度的稳定作用及选择性，而且该类化合物表现出光活性，成为DNA的光切断剂。溴乙锭是应用较广的菲啶类探针，溴乙锭可结合单链(ssDNA)、双链及多链DNA，与核酸结合后，荧光增强20～30倍，激发波长红移30～40nm，发射波长发生蓝移，Stokes位移较大。双嵌入剂乙锭均二聚物(Ethidiumhomodimer，EthD)的嵌入部分使染料分子与DNA之间形成十分牢固的亲和力，连接常数约1011(溴乙锭仅为105)，同时对三链DNA有高亲和作用，因而更利于应用到抗体、抗癌药物的基因水平的研究。Gherghi等用汞滴电极研究了溴乙锭、吖啶橙与dsDNA的作用，结果显示它们的作用方式完全不同。利用488nm氩离子激光激发和共聚焦荧光成像扫描系统对EthD与DNA的复合物检测，琼脂糖凝胶电泳后，检测灵敏度可达pg(10-12g)级。溴乙锭探针研究dsDNA与树枝状大分子(Dendrimer)的相互作用，对于细胞修复、分子识别等基因生命学有深远意义。富含碱基G的ssDNA可以形成分子内四链结构，溴乙锭的一些衍生物可以增加DNA四链结构的稳定性并作为研究四链结构的荧光探针。它们的一些光谱性质见表1。
