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细菌抗药性实验方法中经典实验

2010-08-20 
把液体培养的细菌涂布在含细菌生长必需营养成分的洋菜培养基上(1,2),保温培养约24小时后,就会在培养基表面出现由每个细菌细胞分裂繁殖所形成的......

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关于生物抗药性的两个经典实验

  生物都具有不同程度的抗药性,抗药性的出现是突变的结果,是不定向。通过一系列的实验可以证明这个结论。在实验题中常出现两个经典的实验:

  1 果蝇抗药性的实验

  为了证实突变和自然选择学说,实验者曾把混合群体中的果蝇成对分开,繁殖为若干家系。把每一家系分装两瓶,让其中一瓶作DDT的抗性鉴定,也就是把涂有一定剂量DDT的玻片放入各个家系供鉴定的果蝇瓶中。如果鉴定结果某一家系存活率最高,就把该家系另一瓶未放DDT玻片的果蝇选留,再一对对分开繁殖为若干家系。每一家系同样分装两瓶,让其中一瓶作DDT的抗性鉴定,并增加玻片上DDT的剂量。鉴别结果又有某一家系存活率最高,便又把该家系另一瓶未和DDT玻片的果蝇选留,同样再一对对分开繁殖。这样,经过连续十多次的鉴定和选择,并且每次鉴定都增加玻片上DDT的剂量,选留下来的抗性家系抗DDT的能力可比原来的增加几百倍。在这一实验中,DDT只起选择鉴别的作用,每次留下来作种的是抗性家系中未接触DDT的那一半,所以从实验开始到结束,它的后代都从未接触过DDT,这证明果蝇的抗药性不是定向变异和获得性遗传,而是在突变基础上单向性选择的结果。

  2细菌抗药性实验

  用细菌作实验更可以在短期内获得卓有成效的结果,其中最著名的是利德伯格创造的细菌影印培养实验(见下图)。

  实验开始,把液体培养的细菌涂布在含细菌生长必需营养成分的洋菜培养基上(1,2),保温培养约24小时后,就会在培养基表面出现由每个细菌细胞分裂繁殖所形成的许多菌落。这时,可用缚有平绒跟培养皿直径一致的圆柱体按预先做好的箭号标证印到培养基上。这样,每个细菌菌落便有部分细菌细胞按一定位置影印到平绒上(3)。把缚有平绒的圆柱体同样按照箭号标记转移影印到另一个含青霉素或链霉素的洋菜培养基上(4),再保温培养,就可鉴定出那些能继续繁殖的抗性菌落。这些抗性菌落是不是接触了抗菌素以后通过定向变异产生的呢?按照抗性菌落的位置在原来培养基上找出相应的菌落,并把它们接种到不含抗菌落,并把它们接种到不含抗菌素的洋菜培养基上,由于有其他细菌的竞争,由它们所形成的菌落便布满在洋菜培养基上。随机挑选其中若干菌落进行抗药性鉴定,结果表明它们虽然没有接触过抗菌素,却都表现为抗性细菌。这说明,细菌的抗药性是突变基础上单向性选择的结果。

  相关试题赏析:

  【例】为了研究细菌对青霉素抗药性形成的机理,有人设计了如下实验方案:

  步骤1:取培养皿A若干(A1、A2、A3……),加入普通细菌培养基;取培养皿B若干(B1、B2、B3……),加入含青霉素的细菌培养基。

  步骤2:将适量细菌培养液涂抹在培养皿A1的培养基表面,放在适宜的条件下培养一段时间,培养基的表面会出现一些菌落。(细菌的群落)。

  步骤3:用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”,在A1上轻轻盖一下,再在B1上轻轻盖一下,这样A1中的细胞就按一定的方位准确的“复制”到了B1之中。将B1培养一段时间后,B1中一定部位出现了少量菌落。

  步骤4:根据B1中菌落出现的方位,将A1中对应位置的菌落取出(见图示),均匀涂抹在A2的表面,培养一段时间后,培养基表面又会出现许多菌落。

  反复重复步骤3、4,在B2、B3……中保留下来的菌落越来越多。直到最后,所有“复制”到B中的菌落全部保留下来,都具有了对青霉素的抗药性。

  (1)通过实验可以知道,细菌抗药性的产生首选是细菌出现 的原因。青霉素在细菌抗药性形成的过程中起 作用。

  (2)实验中所用细菌的代谢类型属于 。

  (3)如果B1中没有菌落保留下来,实验就无法进行下去。若要使实验进行下去,可以采用的方法有: 。

  【解析】:本题详细的介绍了细菌抗药性产生的过程。A系列为普通细菌培养基,B系列则为含青霉素的细菌培养基,在B上生存的细菌为抗青霉素的细菌。实验采用了扩大培养的方法,不断的选择出抗药性的细菌。细菌出现抗药性是一种变异,青霉素的使用起到了选择的作用。由于培养的细菌在表面出现菌落,所以细菌的代谢类型为需氧异养型。B1中没有菌落保留下来,说明没有抗青霉素的细菌,可以考虑通过诱变方法处理,以期得到需要的细菌。

  答案(1)变异/选择(2)需氧异养型(3)用各种射线或激光 照射

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