(一)有进食可疑食物，特别是火腿、腊肠、罐头或瓶装食品史，同餐者集体发病。
(二)有特殊的神经系统症状与体征，如复视、斜视、眼睑下垂、吞咽困难，呼吸困难等。
(三)确诊可用动物试验查患者血清及可疑食物中的肉毒毒素，亦可用可疑食物进行厌氧菌培养，分离病原菌。在战争环境中，须警惕敌人施放含肉毒素的气溶胶;如有可疑，可将气溶胶从附着处洗下，进行动物试验。
1.动物试验
(1)取早期血清注入小白鼠(或豚鼠、小猫)腹腔，每鼠1毫升，对照组分别加用A、B、E、F型抗毒素，如有肉毒毒素，则小白鼠出现呼吸困难及蜂腰(腰部凹下如蜜蜂)和失声，但加用同型抗毒素者无症状。
(2)取可疑食物生理盐水浸出滤液，用上述方法注入小白鼠腹腔，观察结果，另外以经100℃加热20分钟灭毒的浸出滤液为对照。
