第五章 分光光度法
第一节 紫外—可见分光光度法
一、基本原理
紫外—可见吸收光谱属分子吸收光谱，是由分子的外层价电子跃迁产生的。
lambert-beer定律 a＝ecl
a为吸收度，e为吸收系数，c为被测物质溶液浓度，l为光路长度。吸收系数e是物质的物理常数，随浓度c单位的不同有不同表示方法。
药品检验中使用百分吸收系数 ，物理意义是当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100 ml)，液层厚度为1cm时的吸收度。
二、可见－紫外分光光度计
光源－单色器－吸收池－检测器－数据记录和处理
1.光源：紫外区采用氢灯或氘灯，可见光区采用钨灯
2.单色器：狭缝宽度大，单色光纯度差；宽度过小，检测灵敏度降低
3.吸收池：玻璃池适用于370nm以上的可见光区，石英池适用于紫外、可见光区，通常仅在紫外光区使用
三、吸收度的测定方法
1.对溶剂的要求：能充分溶解样品，与样品无相互作用，挥发性小，在测定波长处的吸收应符合要求
2.空白对照实验：将溶剂装入参比池，调节吸收度为0，去除溶剂和容器吸收、光散射、反射的影响。
3.测定波长确证
4.供试品溶液浓度：使吸收度在0.3～0.7范围内。
5.狭缝宽度：以减少狭缝宽度时，供试品溶液吸收度不再增加为准。
五、应用
1.鉴别
(1) 对比吸收光谱特征参数：核对供试品溶液λmax、 、a是否符合规定。可同时用几个峰位作为鉴别依据
(2) 比较吸收度比值一致性：吸收峰较多时，规定几个波长处吸收度比值作为鉴定标准
(3) 对比吸收光谱一致性
2.杂质检查
药物在紫外-可见光区有明显吸收，而杂质吸收弱；或杂质有明显吸收而药物无吸收，可通过控制吸收度限度来控制杂质量。
3.含量测定
(1) 对照品比较法：供试品溶液和对照品溶液浓度及测定条件应尽可能一致
(2) 吸收系数法：需对仪器进行严格校正和检定
(3) 计算分光光度法：通过数学处理消除样品中干扰组分的干扰
(4) 比色法：供试品与对照品同时操作
第二节 荧光分析法
一、基本原理
荧光的产生：此化学物质能从外界吸收并储存能量（如光能、化学能等）而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量可以电磁辐射的形式放射（即发光）。荧光发射的特点是：可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光；而一旦停止供能，发光（荧光）现象也随之在瞬间内消失。
发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱（荧光光谱），即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰
物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。
二、荧光分光光度计
激发光源→激发光单色器→样品池
↓
发射光单色器→检测器→数据记录处理
样品池用低荧光材料制成，四面透光，发射光方向与激发光成直角。
三、应用
荧光分析可用于鉴别和含量测定。一般采用对照品比较法测定含量，灵敏度高、选择性好，但干扰多、线性范围窄，多用于需要高灵敏度和允许较大变异性的样品分析。
第三节 红外分光光度法
一、基本原理
红外光谱是由分子的振动、转动能极引起的光谱。当用一定频率的红外光照射某物质分子时，若该物质的分子中某基团的振动频率与它相同，则此物质就能吸收这种红外光，使分子由振动基态跃迁到激发态。
因此，若用不同频率的红外光依次通过测定分子时，就会出现不同强弱的吸收现象。用ｔ％－λ作图就得到其红外光吸收光谱。红外光谱具有很高的特征性，每种化合物都具有特征的红外光谱。用它可进行物质的结构分析和定量测定。
二、红外光谱仪
光源－吸收池－单色器－检测器－数据记录和处理
三、红外光谱与物质结构的关系
一般将振动形式分成两类：伸缩振动和变形振动。
（1）伸缩振动
原子沿键轴方向伸缩，键长发生变化而键角不变的振动称为伸缩振动，用符号ν表示。
（2）变形振动（又称弯曲振动或变角振动）
基团键角发生周期变化而键长不变的振动称为变形振动，面内变形振动又分为剪式（以δ表示）和平面摇摆振动。
红外光谱区可分成4000 cm-1 ~1300cm-1和1300 cm-1 ~ 400 cm-1两个区域。最有分析价值的基团频率在4000 cm-1 ~ 1300 cm-1 之间，这一区域称为基团频率区、官能团区或特征区。区内的峰是由伸缩振动产生的吸收带，比较稀疏，容易辨认，常用于鉴定官能团。
四、应用
1鉴别：红外光谱特征性强，鉴别时按《药品红外光谱集》中收载的制备方法制备，与该品种对照图谱比较应一致。
2.检查：依据药物与其同质异晶杂质在特定波数的吸收有显著差异，对无效或低效晶型进行检查
第三章 药品质量及其监督检验
第一节 药品质量特性
1、药品的质量特性：4个方面：有效性、安全性、稳定性、均一性。
2、药品作为特殊商品的特征：生命关连性、高质量性、公共福利性、高度的专业性、品种多样性。
第二节 药品质量和药品质量监督检验
1、我国药品质量管理规范的名称、制定目的和适用范围
《药物非临床研究质量管理规范》：glp，非临床研究必须遵守的规范。在实验室条件下评价药物安全性。某些研究需要在glp实验室进行试验。
《药物临床研究质量管理规范》：gcp，临床研究必须遵守的规范。各期临床试验、人体生物利用度等必须遵守的规定。
《药品生产质量管理规范》：gmp，在药品生产过程实施质量管理，保证质量，生产和质量管理的准则。目的是指导企业规范生产，保证生产合格产品。
《药品经营质量管理规范》：gsp，目的：控制和保证药品的安全性、有效性、稳定性；控制和保证假药、劣药及一切不合格不合法的药品不进入流通领域，不到使用者手中；做到按质、按量、按期、按品种、以合理的价格满足医疗保健的需要。
《中药材生产质量管理规范（试行）》：gap，中药材生产全过程的质量管理规范。
2、药品质量监督检验的性质、类型
药品监督检验与生产检验、验收检验的性质不同，具有第三方检验的公正性，代表国家，具权威性；依据法律，更强的仲裁性。
类型：抽查性检验、注册检验、国家检验、委托检验、进口检验、复验（有异议时）
第四章 行政法的相关内容
第一节 法的基本知识
法律渊源：是法的效力渊源，是指一定的国家机关依照法定职权和程序制定或认可的具有不同法律效力和地位的法的不同表现形式，也即根据法的效力来源不同，而划分的法的不同形式。如制定法、判例法、习惯法、法理等。
法律效力：是指法律的适用范围，即法律在什么领域、什么时期和对谁有效的问题，也就是法律规范在空间上、时间上和对人的效力问题。包括：空间效力、时间效力、对人的效力。
（法律效力的层次：上位法的效力高于下位法；同一位阶的法，特别规定优于一般规定，新的规定优于旧的规定）
法律责任：是指人们对自己的违法行为所应承担的带有强制性的否定法律后果。包括：民事责任、行政责任、刑事责任、违宪责任。（法律责任的构成：违法行为／否定性的法律后果）
第二节 行政许可
1、行政许可的设定、实施行政许可的原则、设定行政许可的事项
原则：法定原则、公开、公平、公正原则、便民和效率原则、信赖保护原则。
事项：共6项。与药品有关的有：gmp认证、gsp认证、药品生产许可证、经营许可证的核发、执业药师注册等。
2、申请与受理
行政相对人（或其代理人）提出行政许可申请；行政机关受理行政许可申请。
3、行政许可的费用：是指行政机关实施行政许可和对行政许可事项进行监督检查收取的费用，是一种行政收费。
4、撤销行政许可的情形：5种情况。但如果可能对公共利益造成重大损害的，不予撤销。
练习题：
一、最佳选择题：
1、药品的质量特性是：b
a、有效性、安全性、稳定性、
b、有效性、安全性、稳定性、均一性
c、生命关连性、高质量性、高度的专业性
d、有效性、安全性、高质量性
e、有效性、高质量性、高度的专业性
2、药品作为特殊商品的特征是：e
a、生命关连性、安全性、稳定性、品种多样性。
b、有效性、安全性、生命关连性、高质量性、公共福利性
c、高质量性、安全性、生命关连性、高质量性、公共福利性
d、生命关连性、安全性、有效性
e、生命关连性、高质量性、公共福利性、高度的专业性、品种多样性
3、控制和保证药品的安全性、有效性、稳定性；控制和保证假药、劣药及一切不合格不合法的药品不进入流通领域的规范是：c
a、glp
b、gcp
c、gsp
d、gmp
e、gap
4、药品质量特性的均一性是指：e
a、每一剂型都符合药品有效性、安全性的规定要求
b、每一企业产品都符合药品有效性、安全性的规定要求
c、每一规格都符合药品有效性、安全性的规定要求
d、每一品种都符合药品有效性、安全性的规定要求
e、每一单位产品都符合药品有效性、安全性的规定要求
5、不属于行政许可原则的是：e
a、法定原则
b、公开、公平、公正原则
c、便民和效率原则
d、信赖保护原则
e、公共福利性原则
二、配伍选择题
a、glp
b、gcp
c、gmp
d、gsp
e、gap
6、药物非临床研究质量管理适用的规范是：a
7、药品经营企业质量管理适用的规范是：d
a、宪法
b、法律
c、行政法规
d、地方性法规
e、民族自治法规
8、由国家主席签署主席令公布的法律是：b
9、由总理签署国务院令公布的法律是：c
三、多选题
11、药品质量监督检验的类型包括：abcde
a、抽查性检验
b、注册检验
c、国家检验
d、委托检验
e、进口检验
12、法律效力包括：cde
a、约束效力
b、强制效力
c、空间效力
d、时间效力
e、对人的效力
13、食品药品监督管理部门实施的与药品相关的行政许可有：abcde
a、gmp认证
b、gsp认证
c、药品生产许可证
d、经营许可证的核发
e、执业药师注册
14、法律责任包括：abce
a、民事责任
b、行政责任
c、刑事责任
d、赔偿责任
e、违宪责任
15、撤销行政许可的情形有：abde
a、行政机关工作人员滥用职权、玩忽职守作出准予行政许可决定的
b、超越法定职权作出准予行政许可决定的
c、可能对公共利益造成重大损害的
d、违反法定程序作出准予行政许可决定的
e、对不具备申请资格或者不符合法定条件的申请人准予行政许可的
