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二零一零年检验辅导:基因工程抗体技术

2010-08-20 
读书人医药频道医药资格考试专业网站 http://www.reader8.com/exam/yiyao/   由于杂交瘤单克隆抗体为异源性蛋白,应用于人时易产生抗小鼠抗体,基因工程抗体通过基因工程技术改造现有优良的鼠单克隆抗体基因。尽量减少抗

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  由于杂交瘤单克隆抗体为异源性蛋白,应用于人时易产生抗小鼠抗体,基因工程抗体通过基因工程技术改造现有优良的鼠单克隆抗体基因。尽量减少抗体中鼠源成分,保留原有抗体特异性,从而创造出一种新型抗体。
  一、人源化抗体
  人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造,重新表达的抗体,其大部分氨基酸序列为人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。
  1.人-鼠嵌合抗体
  此抗体为通过基因工程技术,将人IgG C区与鼠IgV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。
  2.抗体的表面修饰,使Fv表面人源化。
  二、小分子抗体
  此为分子量小,具有抗原结合功能的分子片段,包括Fab,Fv,单链抗体,单区抗体等。
  此种抗体分子量小,可在大肠杆菌等原核细胞表达,在人体内穿透力强,有利于疾病的治疗。
  三、抗体融合蛋白
  将抗体分子片段与其他蛋白融合,可得到多样性生物功能的融合蛋白,如:
  1.含Fv段的抗体融合蛋白:将Fv与某些毒素、酶、细胞因子基因拼连,通过这些抗体的引导,可将其生物活性物质导向靶细胞特定部位,所谓“生物导弹”。
  2.嵌合受体:将ScFv与某些细胞膜蛋白分子融合,形成的融合蛋白,可表达于细胞表面,称为嵌合受体,由于其介导的杀伤效应不受MHC限制,在过继性免疫治疗中有潜在应用价值。
  3.含Fc的抗体融合蛋白:CD4分子细胞膜外部分与Fc融合后由真核细胞表达。此融合蛋白能竞争结合HIV,阻断HIV对敏感细胞的感染;还可介导ADCC及CDC,可通过胎盘。
  四、双特异性抗体
  双特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到双特异性抗体。
  双特异性抗体能同时结合两种抗原,因而可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞,在免疫学检测中可简化操作步骤,提高检验质量;应用双特异性抗体介导的药物杀伤效应可用于肿瘤等的治疗。
  五、抗体库技术
  抗体库技术是指基因克隆技术将全套抗体重链及轻链可变区基因克隆出来,重组到质粒表达载体,通过大肠杆菌直接表达有功能的抗体分子片段,最后筛选到特异的可变区基因,现有组合抗体库技术及菌体抗体库技术。

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来源:读书人-医学检验技士、技师、主管技师考试

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