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用各种标记物标记抗原(或抗体),测定相应的抗体(或抗原)的方法。这种技术具有高度敏感性和特异性,因而得到广泛应用。根据标记方法的不同,主要分为荧光抗体技术(在抗体上标记荧光色素)、放射免疫测定(在抗原或抗体上标记放射性同位素)和酶联免疫吸附试验(在抗原或抗体上结合适当的酶)。荧光抗体技术和放射免疫测定虽然应用较广,但又各有缺点:前者操作时间长,肉眼观察结果不可靠,也不能定量和自动化;后者自动化设备价格太高,放射性同位素试剂的半衰期很短,而且会危及人体的健康。酶联免疫吸附试验具有上述两法的优点而无其缺点,是一种敏感、快速而简便的方法。
以荧光色素标记抗体,制备成荧光抗体(简称FA),然后用这种荧光抗体涂染被检查的标本,再以紫外线光源的荧光显微镜进行检查。如果见到有发出荧光的抗原抗体反应物,即表明标本中有与荧光抗体相对应的抗原而被荧光抗体着染。这一技术的操作有直接和间接两种方法:直接法是以荧光素标记的特异性抗体直接与相应抗原结合,用于检测未知的抗原;间接法是将未标记的抗体与相应抗原结合起来,再加上用荧光素标记的抗抗体,形成抗原-抗体-荧光抗抗体复合物,用于检测未知的抗原或抗体。因为间接法所用标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,能与所有的同种属的抗体结合,所以比直接法方便,而且敏感性高。
利用此项技术可以比较准确、迅速、敏感地测出少量抗原、抗体以及抗原-抗体复合物在细胞内或组织内的定位和分布。此项技术已应用于免疫学、细菌学、病理学、肿瘤学的基础理论研究以及临床快速诊断.