新华中学 王季明
三、深入和扩展
1.植物组培对光的要求
愈伤组织的培养: 首次培养——不需光
继代培养——需要光
试管苗的培育:进行见光培养
2.胚状体与根、芽
愈伤组织的形态发生主要有不定芽方式和胚状体方式两种。
①不定芽方式:通过营养物质和生物调节物质的适当配比,可以从愈伤组织诱导出芽和根的顶端分生组织,并可由此再生出新的植株。
②胚状体方式:愈伤组织培养物可以放在摇床上,通过试管液体悬浮培养分散成单细胞。这种单细胞具有丰富的细胞质、小型的液泡和大的细胞核,具有胚性细胞的特征,在适宜的培养基中可发育成胚状体,然后再继续发育成植株。这种从单个体细胞分裂、分化、发育成胚状体的过程,与受精卵分裂、分化和发育成胚的过程很相似。
3.原生质体培养
通过细胞壁的水解酶——纤维素酶和果胶酶除去细胞壁,获得分离的原生质体,然后通过原生质体培养也可产生再生植株。
一、知识主干
二、要点提示
1.植物体细胞杂交技术的起止点
起点:来自不同植物的体细胞a和体细胞b
终点:杂种植株
2.理论依据:
植物体细胞杂交技术由两部分组成,即植物细胞融合及植物组织培养。前者的理论依据是细胞膜具有一定的流动性,而后者则依据植物细胞的全能性。
3.酶解法去壁——制备原生质体:
根据酶的专一性原理,用纤维素和果胶酶去除细胞壁,为不同植物体细胞的原生质体融合扫除了障碍。
4.诱导原生质体融合的方法:
物理法:离心、振动、电刺激
化学法:化学诱导剂,例如聚乙二醇(peg)
此诱导方法只实现了膜的融合,而细胞核的融合在杂种细胞第一次有丝分裂时方得以实现。
5.杂种细胞的筛选:
如图所示,诱导原生质体融合后,将原生质体转移到适当的培养基上进行培养,使原生质体再生出细胞壁。这时,在细胞混合物中不仅有ab型杂种细胞,也有a型、aa型、b型、bb型细胞,可采用机械方法、生理学或遗传学方法筛选出杂种细胞,并将其进一步培养成杂种植株。
6.杂种植株遗传物质的变化:
杂种植株的染色体数是两亲本细胞染色体数之和(结合遗传和变异的相关知识)。